RNA各種可逆的化學(xué)修飾被認(rèn)為是一種新的表觀遺傳調(diào)控方式。m6A是真核生物mRNA常見(jiàn)的化學(xué)修飾,在調(diào)控mRNA穩(wěn)定性,剪切和翻譯方面具有重要的作用。作者使用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序發(fā)現(xiàn)了METTL3(甲基轉(zhuǎn)移酶3),一種主要的RNAN6-腺苷-甲基轉(zhuǎn)移酶,在人肝細(xì)胞(HCC)和多種實(shí)體中高表達(dá)。在臨床上,METTL3的過(guò)度表達(dá)與肝細(xì)胞患者不良預(yù)有關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)證明敲除METTL3會(huì)抑制HCC細(xì)胞增殖,遷移及克隆形成。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明敲除METTL3會(huì)明顯抑制HCC體內(nèi)成瘤和肺轉(zhuǎn)移。另外,使用CRISPR/dCas9-VP64系統(tǒng),內(nèi)源性高表達(dá)METTL3會(huì)促進(jìn)HCC細(xì)胞在體外和體內(nèi)生長(zhǎng)。通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、m6A-Seq、MeRIP-PCR,作者確定了SOCS2(細(xì)胞因子信號(hào)2的抑制因子)作為METTL3介導(dǎo)的m6A修飾的下游靶基因。敲除METTL3表達(dá)會(huì)消除SOCS2mRNAm6A修飾并增強(qiáng)SOCS2mRNA表達(dá)。m6A介導(dǎo)的SOCS2mRNA降解是依賴于m6A“讀取器”蛋白YTHDF2。總之,METTL3在HCC大部分高表達(dá)中,并通過(guò)m6A-YTHDF2依賴機(jī)制抑制SOCS2表達(dá)從而促進(jìn)HCC進(jìn)展。因此,作者發(fā)現(xiàn)了在肝發(fā)生過(guò)程中表觀遺傳改變的一種新機(jī)制。圖4RNA甲基化轉(zhuǎn)移酶METLLT3在肝組織中高表達(dá)。由于大部分研究使用到的是人類(lèi)來(lái)源的細(xì)胞,種植到免疫正常的動(dòng)物體內(nèi)會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。小鼠科研技術(shù)服務(wù)構(gòu)建
啟醫(yī)療,個(gè)體化用藥貝克曼庫(kù)爾特細(xì)胞專(zhuān)題--助力病毒載體純化、細(xì)胞特性分析產(chǎn)品庫(kù)儀器設(shè)備耗材試劑抗體技術(shù)服務(wù)生物芯片芯片掃描儀|芯片點(diǎn)樣儀|生物芯片系統(tǒng)|生物芯片|其它測(cè)讀系統(tǒng)洗板機(jī)|多功能篩選系統(tǒng)|大型分析系統(tǒng)|化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀|分光光度計(jì)|其它|光譜系統(tǒng)原子吸收光譜儀|可見(jiàn)光光譜儀|熒光光譜儀|紅外光譜儀|近紅外光譜儀|LIBS光譜儀|拉曼光譜儀|紫外/可見(jiàn)/近紅外光譜儀|其它分子生物實(shí)驗(yàn)儀器電泳設(shè)備|紫外設(shè)備|普通PCR儀|定量PCR儀|數(shù)字PCR儀|DNA/有機(jī)/多肽合成|轉(zhuǎn)基因儀|其它顯微系統(tǒng)倒置顯微鏡|實(shí)體顯微鏡|生物顯微鏡|電子顯微鏡其它顯微鏡|顯微操縱|附件和濾光片|其它色譜系統(tǒng)液相色譜系統(tǒng)|制備液相色譜系統(tǒng)|毛細(xì)管LC系統(tǒng)氣相色譜系統(tǒng)|離子色譜系統(tǒng)|色譜系統(tǒng)檢測(cè)器樣品管理工具|色譜系統(tǒng)附件質(zhì)譜系統(tǒng)飛行質(zhì)譜|四極桿質(zhì)譜|離子阱質(zhì)譜|等離子質(zhì)譜|毛細(xì)管電泳/質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)|雜交質(zhì)譜|質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)品|其它實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化氨基酸分析系統(tǒng)|蛋白純化系統(tǒng)|蛋白質(zhì)翻譯系統(tǒng)|全自動(dòng)分液系統(tǒng)|核酸提取純化全自動(dòng)血液采樣系統(tǒng)|基因組/蛋白組設(shè)備DNA測(cè)序儀|全基因組測(cè)序儀|基因分型系統(tǒng)|雙向電泳系統(tǒng)|蛋白質(zhì)純化|蛋白質(zhì)斑點(diǎn)切取系統(tǒng)|其它神經(jīng)生物學(xué)儀器動(dòng)物功能檢測(cè)設(shè)備|動(dòng)物處理設(shè)備|。廣西兔科研技術(shù)服務(wù)購(gòu)買(mǎi)protocol 分享|小鼠卵巢組織切片 HE 染色。
shRNA)蛋白檢測(cè)蛋白純化蛋白分析蛋白修飾細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)藥物篩選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臨床檢測(cè)試劑相關(guān)檢驗(yàn)試劑抗體庫(kù)抗體抗體制備第二抗體試劑盒抗體相關(guān)抗體庫(kù)抗體抗體制備第二抗體試劑盒抗體相關(guān)技術(shù)服務(wù)庫(kù)整體實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)細(xì)胞生物學(xué)服務(wù)測(cè)序/分子生物學(xué)服務(wù)生物芯片服務(wù)蛋白相關(guān)服務(wù)新藥研發(fā)外包服務(wù)技術(shù)服務(wù)庫(kù)整體實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)分子生物學(xué)服務(wù)寡核苷酸合成細(xì)胞生物學(xué)服務(wù)干細(xì)胞技術(shù)服務(wù)微生物學(xué)服務(wù)免疫學(xué)服務(wù)蛋白相關(guān)服務(wù)生物芯片服務(wù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物服務(wù)新藥研發(fā)外包服務(wù)大型儀器測(cè)試與驗(yàn)證服務(wù)儀器維修服務(wù)技術(shù)培訓(xùn)服務(wù)其它服務(wù)活動(dòng)專(zhuān)題CellSignalingTechnology學(xué)堂生物標(biāo)志物檢測(cè)將如何推進(jìn)抗藥物研發(fā)細(xì)胞焦亡信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白和研究動(dòng)態(tài)2018免疫與生物網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)期精選課程Webinar直播企業(yè)學(xué)堂微芯片上的生化室已有244061人觀看輕松搞定疫苗的作用機(jī)制已有219615人觀看Medidata如何改善患者在臨床研究中的體驗(yàn)已有214453人觀看安捷倫2017二代測(cè)序系列講座之2:靶標(biāo)富集和文庫(kù)構(gòu)建技術(shù)大觀Merck新型解決方案原位RNA表達(dá)檢測(cè)方案及基礎(chǔ)研究實(shí)例分析BIO-RAD學(xué)堂GE技術(shù)大咖秀CellSignalingTechnology學(xué)堂技術(shù)專(zhuān)題第十一屆中國(guó)生物產(chǎn)業(yè)大會(huì)暨第三屆“中國(guó)光谷”國(guó)際生命健康產(chǎn)業(yè)博覽會(huì)火熱。
應(yīng)根據(jù)所檢測(cè)指標(biāo)的要求,需采取不同策略處理。在如今分子學(xué)當(dāng)?shù)赖默F(xiàn)實(shí)背景下,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)除了對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體征及生理指標(biāo)進(jìn)行全的監(jiān)控外,各種分子檢測(cè)甚至是組學(xué)檢測(cè)也開(kāi)始大行其道,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后的機(jī)制研究成為了實(shí)驗(yàn)的重頭戲。一般來(lái)說(shuō),動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)象主要包括:(1)體液中各類(lèi)因子定性及定量檢測(cè)由于此類(lèi)檢測(cè)對(duì)象多為蛋白及各類(lèi)小分子物質(zhì),因此在取樣過(guò)程中應(yīng)注意防止此類(lèi)物質(zhì)降解,在獲取后,應(yīng)及時(shí)置于溫(≤-80℃)進(jìn)行保存,在后續(xù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,也應(yīng)當(dāng)注意保存條件的穩(wěn)定性,避免反復(fù)凍融。常用的方法便是酶聯(lián)免吸附測(cè)定(ELISA),除此之外,可利用生化分析儀及不同檢測(cè)方法的(比色法、比濁法等)方法對(duì)各類(lèi)生化指標(biāo)及因子進(jìn)行定性及定量檢測(cè)。(2)生理變化及免組化檢測(cè)常用的理檢測(cè)多使用H&E染色對(duì)細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核進(jìn)行染色標(biāo)記,以觀察細(xì)胞變化。除此之外,許多特殊染色也在理生理變化中得到了應(yīng)用,如利用Masson染色檢測(cè)纖維化變,Nissl染色檢測(cè)神經(jīng)元損傷,β-半乳糖甘酶染色檢測(cè)細(xì)胞衰老等。此外,還可以通過(guò)免組化技術(shù)對(duì)某些特異性標(biāo)記物進(jìn)行免顯色檢測(cè),達(dá)到原位定性或定量檢測(cè)的目的。。建立疾病模型的目的是為了防治人類(lèi)疾病。
|基因組DNA擴(kuò)增|RNA擴(kuò)增|克隆與表達(dá)克隆基因|克隆試劑盒|克隆篩選|感受態(tài)細(xì)胞|突變轉(zhuǎn)染|轉(zhuǎn)化|體外轉(zhuǎn)錄/翻譯|其它表達(dá)分析Northern印跡分析|分支DNA和mRNA定量|差別基因表達(dá)|反義寡核苷酸|RACE試劑盒|SAGE試劑盒|其它抗體蛋白A,GPLUS|抑制/凋亡抗體|信號(hào)分子抗體結(jié)構(gòu)蛋白抗體|磷酸化特異抗體|融合蛋白tag抗體非哺乳動(dòng)物蛋白抗體|細(xì)胞周期蛋白抗體|轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體|抗體制備佐劑|抗體片段|抗體同種型|抗體純化|抗體制備試劑盒|其它第二抗體westernblot二抗|免疫組化二抗|其它試劑盒ELISA試劑盒|免疫組化試劑盒|放射免疫試劑盒|westernblot試劑盒|流式細(xì)胞試劑盒|其它抗體相關(guān)siRNA|重組蛋白|白蛋白|試劑|其它分子生物學(xué)服務(wù)DNA提取/純化|DNA測(cè)序|第二代高通量測(cè)序|DNA保存和活化|基因合成|基因步行|基因組分析生物信息學(xué)|SNP檢測(cè)|實(shí)時(shí)定量PCR服務(wù)|文庫(kù)/載體構(gòu)建|寡核苷酸合成Oligo合成|實(shí)時(shí)PCROligo合成|其它細(xì)胞生物學(xué)服務(wù)細(xì)胞培養(yǎng)|流式細(xì)胞檢測(cè)|細(xì)胞毒性測(cè)試|細(xì)胞因子生物檢測(cè)|影像服務(wù)|篩選/發(fā)育服務(wù)|其它干細(xì)胞技術(shù)服務(wù)干細(xì)胞提取|干細(xì)胞鑒定|干細(xì)胞誘導(dǎo)分化|干細(xì)胞常規(guī)檢測(cè)|干細(xì)胞擴(kuò)增|干細(xì)胞轉(zhuǎn)基因|干細(xì)胞其他相關(guān)實(shí)驗(yàn)|微生物學(xué)服務(wù)微生物鑒定|抑菌作用測(cè)試|內(nèi)測(cè)試|內(nèi)。純干貨Western blot (WB)條帶灰度統(tǒng)計(jì)與GraphPad作圖.寧夏實(shí)驗(yàn)科研技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)
免疫系統(tǒng),人體的免疫系統(tǒng)由免疫細(xì)胞、免疫分子構(gòu)成。小鼠科研技術(shù)服務(wù)構(gòu)建
小鼠尾尖用酒精擦拭尾巴,引起輕微的血管擴(kuò)張;用無(wú)菌手術(shù)刀、刀片或鋒利的剪刀,快速截?cái)嘈∈笪布?-2毫米。如果需要多次,之后每次需截除2-3毫米;從尾部像尾尖方向按摩,增加血流;用采集血液;結(jié)束后,按壓傷口或使用止血?jiǎng)﹣?lái)止血;每次量大約可達(dá)。小鼠眼球取血單手保定好小鼠;必要時(shí)剪掉小鼠胡須,防止污染血液;輕壓取血側(cè)眼部皮膚,使眼球充血突出;用彎頭鑷夾取眼球并快速在摘??;同時(shí)用左手中指輕按小鼠心臟部位,以加快心臟泵血速度;當(dāng)血液流盡時(shí),用脫臼法處死小鼠;大鼠眼眶取血先將小鼠進(jìn)行麻醉,大鼠翻正反射消失時(shí)不在繼續(xù)麻醉;抗凝處理過(guò)的玻璃毛細(xì)采樣管,掰成2-3厘米長(zhǎng)度;右手食指和拇指輕按眼眶兩側(cè)皮膚,使眼球突出,毛細(xì)管從內(nèi)側(cè)的眼球與眼瞼的縫隙處進(jìn)入,輕輕旋轉(zhuǎn)毛細(xì)管,稍微深入眼球后上方,血液流速快的時(shí)候4-5滴即可,溫柔的將毛細(xì)管取出;用棉簽按壓大鼠眼眶止血,每次可取血50-100微升,將血液放入冰盒中保存。小鼠心臟取血先將小鼠麻醉,稍靠右側(cè)平躺在手術(shù)板上固定;左側(cè)第三四根肋骨間觸摸心臟,跳動(dòng)明顯,慢慢進(jìn)針;針有回血停止進(jìn)針,開(kāi)始取血;一次可以300到500微升,小鼠存活,放到加熱墊上待小鼠蘇醒后放入籠中。小鼠科研技術(shù)服務(wù)構(gòu)建